外周血检测可指导个体化治疗

    肿瘤是基因组疾病，故单一基因检测难以满足指导个体化治疗的需要。近期多项研究利用二代测序技术分析了血浆游离DNA基因组、外显子组改变与治疗疗效的关系。循环肿瘤细胞是有关外周血分子标志物研究的另一焦点。其作为完整的、无损伤的肿瘤细胞，能反映肿瘤的转移、耐药、进展等过程。

    在该研究中，研究人员比较了循环肿瘤细胞中基于血液KRAS突变分析和循环血浆DNA用于预测肺癌原发性肿瘤突变这两种方法来替代组织活检的可行性。

    研究人员通过利用cobas4800（罗氏）等位基因特异性PCR技术检测肺癌患者KRAS突变状态，该技术的原理是在基因组的某些非编码区，一些短的序列 ( 十几至一百多个碱基 ) 可重复多次，并按照孟德尔遗传法则呈共显性遗传。这种等位基因的多态性常达十个以上，因此这种遗传标记带有很大的信息量。除了等位基因的遗传多态性分析外，还应用于点突变的检测。

    通常需要采集病人9ml血标本就可以检测，利用ScreenCell MB装置捕获循环肿瘤细胞，DNA通过人类组织和细胞DNA提取试剂盒（QIAGEN试剂盒）从循环肿瘤细胞中提取出。通过自定义设计的高分辨率溶解法检测KRAS基因突变，并通过QIAGEN试剂盒进行焦磷酸测序。

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    91例接受肺癌切除手术患者中，通过福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）进行组织活检的18例，通过外周血游离DNA检测的17例，循环肿瘤细胞检测的47例。研究发现，以血液为基础检测KRAS突变试验中，外周血游离DNA检测的敏感度和特异度分别为81%、97%；循环肿瘤细胞检测的敏感度和特异度分别为86%、38%。