HPV临床检测与宫颈癌的筛查
提高宫颈癌的早期防治,关键要重视宫颈癌的筛查及筛查方法。目前伴随着宫颈癌二级预防的广泛开展,新的筛查技术不断出现。
目前有三种可用的检测手段,应用已明显减少而部分经济欠发达地区仍在沿用的传统的巴氏涂片(Pap Smear)法,以及近10余年发展而来的液基细胞学检查(ThinPrep pap test),这两种方法在筛查实践中,特异性相对较高,可是由于主观的检测方法,无法避免主观人为因素的影响,限制了其发展及推广。
目前国际上广为推崇的HR-HPV临床分型检测的应用价值得到肯定,因具有较好的阴性预测值,客观的实验方法,受人为因素相对较小,可重复性较好,能弥补上述不足,渐渐被广泛接受并纳入到宫颈癌的初级筛查当中。美国是较早使用 HPV 检测用于宫颈癌筛查的国家。2003年美国食品药品管理局(FDA)批准HPV-DNA HC2检测联合液基细胞学可用于30岁以上妇女宫颈癌的初及筛查。2
012年美国癌症学会ASC、美国阴道镜和宫颈病理学会(ASCCP)和美国临床病理学会(ASCP)在30至65岁妇女人群中 采用宫颈细胞学和高危型HPV联合检测作为宫颈癌筛查,可很大程度地提高子宫颈癌筛查的敏感性。2014年4月, FDA首先通过了单独应用HPV检测筛查25岁以上女性的子宫颈癌,这种方法可直接影响细胞学在宫颈癌筛查中的普及,凸显了高危型HPV检测在子宫颈癌筛查中的地位。
查阅现阶段中国普遍应用的 HR-HPV检测方法主要有两种,一为广泛采用的较为成熟的二代杂交捕获( HC2) 进行 HR-HPV DNA的定量检测 ;二为采用聚合酶链式反应( PCR) 和反向点杂交(RDB) 相结合的基因芯片技术进行的 HPV分型检测。由于两者可分别提供受检者生殖道 HPV感染的不同信息,因而在宫颈疾病的筛查和跟踪随访中均得到了较为广泛的使用。
1、HC2检测:采用抗体捕获和荧光化学信号技术和全基因组探针,基于信号放大原理的定性HPV体外核酸杂交检测。本方法可检测13种高危型HPV( 16、18、31、35、39、45、51、52、56、58、59、68)的DNA总体水平。HR-HPV DNA HC2与细胞学联合筛查的研究显示联合方案与病理检查结果的阳性符合率、准确性更高,降低了漏诊率。
2、HPV基因分型检测:原理是采取宫颈脱落细胞,PCR体外扩增组织细胞DNA,再使用人乳头瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒,利用核酸分子快速杂交仪为平台,根据导入杂交原理使目的分子穿过在已经固定好核酸探针的低密度基因芯片膜上,进行快速杂交。可同时检测HPV-DNA的23种亚型,包括18种高危亚型:16、18、31、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83,MM4。5种低危亚型:6、11、42、43、44。
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